一步法RT-ddpcr試劑盒(one-step RT-ddPCR kit for probes)的試劑盒讓研究人員能夠**靈敏地測定目標RNA分子，應用于基因表達分析、miRNA分析和病毒載量定量等方面。與通常的逆轉錄之后再對cDNA進行分液不同，如今是先分RNA，再開展逆轉錄和PCR，一切都在液滴中進行，這減少了手動操作，降低了污染的可能性。
此試劑盒將逆轉錄反應與微滴式數字PCR結合起來，為RNA的**定量創造了一個新典范。研究人員可將一步法RT-ddPCR試劑盒與QX100微滴式數字PCR系統結合使用，測定目標RNA拷貝數的微小差異，而在這之前，定量pcr是無法測定的。
它是如何工作的?
一步法RT-ddPCR試劑盒遵循ddPCR流程，只是它的分液對象不是DNA，而是RNA。樣品被分成20,000個微滴，而目標和背景RNA被隨機分布。在逆轉錄之后，生成的cDNA被pcr擴增，以便檢測目標。每個微滴都帶來了一個陽性或陰性的熒光信號，指示目標RNA存在與否。采用微滴分析儀(droplet reader)逐個對每個微滴進行檢測，而軟件計算出每微升樣品中目標RNA的濃度。
與QX100微滴式數字PCR系統聯合使用，一步法RT-ddPCR試劑盒讓研究人員能夠：
?富集稀有的目標RNA序列
?檢測基因表達水平的微小差異
?無需標準曲線，確定RNA分子的拷貝數
與傳統的微流體數字PCR平臺不同，Bio-Rad公司的QX100微滴式數字PCR系統先對樣品進行微滴化處理。這樣的好處是每個樣品可形成20,000個液滴，而其他系統只能分成760-3,000個部分。分得越多，則意味著分析越準確。
滬公網安備 31011002002624號
