不少生物過程都伴隨著蛋白的磷酸化過程，而蛋白質磷酸化的平衡由蛋白激酶和磷酸酶的相互作用達到。因此，了解這些過程中的反應和調節成了不少科研工作者的重頭工作，不過，羅氏推出的PhosSTOP或許能為您分擔部分憂愁。
許多生物學過程和通路的調節都伴隨著磷酸酯的形成和去除;而蛋白的磷酸化狀態的平衡是由蛋白激酶和磷酸酶相互影響達到的。為了了解這些通道，大量的研究工作正在制藥公司和研究院所開展。其中一個重要的步驟就是準確的觀察一般和特異的磷酸化狀態，而這就需要對磷酸化狀態的有效保護。
磷酸化的蛋白可以被非特異性的磷酸酶(例如：堿性磷酸酶)，特異性的絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶、酪氨酸蛋白磷酸酶或雙重特異性磷酸酶去磷酸化。這里，我們就一種新的磷酸酶抑制劑混合片的性能做一介紹，稱之為PhosSTOP。PhosSTOP是一種即用型的片劑，其中的一些磷酸酶抑制劑只需要納摩爾級的量。無需花費漫長的時間尋找合適的磷酸酶，也不必繁瑣的稱量和混合。PhosSTOP可同時持續抑制包括酸性和堿性磷酸酶，及絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(PP1, PP2A, PP2B)和酪氨酸蛋白磷酸酶在內的多種磷酸酶。
一片PhosSTOP可以溶解在10ml的緩沖液中。PhosSTOP具有極好的溶解性，如果需要，可以將2-3片PhosSTOP也可溶解在同樣體積的緩沖液中;相反，也可以選用小體積的緩沖液。溶解后的儲存液體4℃可以穩定保存一個月以上，-20℃下可以保存6個月。
結果和討論
磷酸酶無處不在;依賴于不同的物種、細胞或組織類型、實驗中使用的特異的細胞狀態，磷酸酶的種類和數量都會有差異。雖然每種磷酸酶都表現出不同的底物特異性，依賴不同的物種，幾種分離磷酸酶用以測試抑制效果的范圍。
PhosSTOP可應用于多種細胞提取物中磷酸酶的抑制作用，對酸性和堿性磷酸酶，絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(PP1, PP2A, PP2B)和酪氨酸蛋白磷酸酶的抑制作用見表2。
磷酸酶活性的檢測通過western blots實驗檢測，例如，絲氨酸磷酸酶特異性抗體(圖2)。
PhosSTOP片劑可與含有福爾馬林的緩沖液配合兼容使用;適用于福爾馬林固定樣本，保持組織切片中蛋白的磷酸化狀態。
PhosSTOP片劑蛋白分離過程中有效保護蛋白，不會影響后繼的蛋白檢測(例如：western blot)或是蛋白濃度檢測 (例如：BCA或是Bradford)。
結論和討論
PhosSTOP可以方便的保護磷酸化蛋白免受去磷酸化作用;可持續抑制包括酸性和堿性磷酸酶，及絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(PP1, PP2A, PP2B)，酪氨酸蛋白磷酸酶及雙特異性磷酸酶在內的多種磷酸酶。
PhosSTOP可抑制多種來源的磷酸酶，包括動物，**，植物和酵母細胞;同時還可以與含有福爾馬林的緩沖液兼容，適用福爾馬林和石蠟固定的組織切片。
PhosSTOP與cOmplete 蛋白酶抑制劑兼容，實現對磷酸酶和蛋白酶的**抑制作用。
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您不再需要花費大量的時間尋找合適的磷酸酶，也不需繁瑣的稱量。PhosSTOP可同時持續抑制多種磷酸酶，且具有**的溶解性，并且溶解后的儲存液體可在4℃條件下穩定保存一個月以上。
