ELISA操作過程多，新手操作難免會(huì)有過錯(cuò)。而這些過錯(cuò)許多是由細(xì)節(jié)不夠好形成的，減少過錯(cuò)的辦法有許多，比方做試驗(yàn)時(shí)少說話，避免唾液掉進(jìn)酶標(biāo)條中。當(dāng)然，大家還要學(xué)會(huì)自己開掘問題，找出原因。今天教您怎么完善ELISA試劑盒試驗(yàn)中的過錯(cuò)?
1，評(píng)價(jià)試劑的實(shí)用性，試劑的安穩(wěn)與否，對(duì)準(zhǔn)確率的凹凸到頭重要。在試劑啟用前，應(yīng)進(jìn)行陰、陽對(duì)照及樣品重復(fù)比照試驗(yàn)，判定試劑符合要求后方可運(yùn)用。
2，操作前仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)厲按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不行混用。值得改善的地方，重復(fù)試驗(yàn)確認(rèn)建立后才能改善，比方洗板次數(shù)的掌握等。
3，加樣要準(zhǔn)確、快速。加樣不準(zhǔn)確，酶生成物的量不能確認(rèn)，直接影響顯色成果。別的，顯色的深淺及A值的測(cè)定與加入顯色劑和停止液的量有關(guān)，所以加樣應(yīng)慎重。要求在必定時(shí)刻內(nèi)加樣完畢的試驗(yàn)，如果加樣緩慢，便出現(xiàn)誤差，而且試劑長期暴露在外，尤其室溫過高時(shí)，保存期會(huì)縮短乃至失效。
4，檢驗(yàn)技師應(yīng)具有從事試驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作試驗(yàn)儀器、器械，具有必定總結(jié)和剖析問題的才能，對(duì)試驗(yàn)中出現(xiàn)的意外狀況能及時(shí)妥善解決。
5，運(yùn)用校對(duì)過的微量移液器，排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。
6，嚴(yán)格掌握顯色時(shí)刻，顯色時(shí)刻過短，加入停止液反響停止后，底物結(jié)合物的量過少，易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時(shí)刻后顯色，應(yīng)判為假陽性，這或許與試劑自身有關(guān)。加顯色劑后當(dāng)即顯色，不行報(bào)陽性，這或許是本底顯色的成果。
7，洗刷完全，洗板不完全，ELISA試劑盒酶結(jié)合物本底顯色會(huì)出現(xiàn)假陽性。別的，洗刷液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳腐的洗刷液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也或許出現(xiàn)假陽性。
8，嚴(yán)控反響時(shí)刻，反響時(shí)刻過長，酶失活；反響時(shí)刻過短，酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合，生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固，容易洗掉，都或許形成假陰性。
