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        新聞資訊

        QIAGEN:miRNA研究全方案(下)

        大量的證據表明,miRNA表達的失調是一些**過程(包括許多癌癥)的起因或指示劑。研究還發現血清和血漿中可以檢測到循環miRNA,且它們的表達因**而異,這一發現說明循環miRNA的表達特征可作為**診斷和預防的生物標志物,具有巨大潛力。

        miRNA研究的成功依賴于高性能工具和技術的使用。Qiagen是一個一站式供應商,滿足您在miRNA純化、定量和功能鑒定上的所有需求。歡迎訪問QIAGEN的GeneGlobe? 網頁(www.qiagen.com/GeneGlobe),訂購miRNA特異的產品,并發現大量寶貴的基因信息、通路信息和生物信息學工具。

        QIAgen提供了以下方案:

        一、miRNA純化

        利用miRNeasy Kits和PAXGENE? Kits純化高質量總RNA,包括miRNA。

        二、miRNA表達譜分析

        利用miScript? miRNA PCR Arrays快速分析整個miRNA組(miRNome)或通路聚焦的miRNA分析板

        三、miRNA生物發生和調控研究

        利用miScript PCR System同時定量成熟的miRNA(聯合miScript Primer Assays)、前體miRNA(聯合miScript Precursor Assays)和mRNA目標(聯合QuantiTect? Primer Assays)。

        四、miRNA功能分析

        利用miScript miRNA Mimics、Inhibitors和Target Protectors確定miRNA的功能。

        揭開miRNA生物發生的機制

        對于一些研究前體miRNA與成熟miRNA的關系的實驗,必須能靈活檢測同一cDNA樣品中兩種類型的miRNA。利用miScript II RT Kit 以miScript HiFlex Buffer 制備的cDNA就具有這種靈活性。在實時定量PCR中,成熟miRNA可利用miScript Primer Assays檢測,而前體miRNA可利用miScript Precursor Assays檢測。單獨的miScript Primer Assays 和miScript Precursor Assays 可在GeneGlobe網頁上查找。對于不同miRNA來說,成熟miRNA與前體miRNA的相對水平存在差異。此外,在不同條件下或不同組織中,成熟miRNA可從不同的前體miRNA中表達。

        miRNA的功能分析

        在功能研究中查明miRNA的作用

        miRNA功能研究讓您能夠鑒定出特定miRNA的目標和作用,分析個別miRNA失調的生物學影響,并驗證某個基因是特定miRNA的目標。功能研究可利用miScript miRNA Mimics、miScript miRNA Inhibitors和miScript Target Protectors來開展。目前可訂購各種規格和形式,包括管、96孔板和384孔板。

        發現miRNA功能的策略:

        1.利用miScript miRNA Mimics模擬內源miRNA的調控

        2. 利用miScript miRNA Inhibitors抑制內源miRNA

        3. 利用miScript Target Protectors保護單個miRNA目標基因

        利用miScript miRNA Mimics來復制內源miRNA的功能

        miScript miRNA Mimics是合成的雙鏈RNA,它們在轉染進入細胞后模擬了天然存在的miRNA。miScript miRNA Mimics導致基因表達下降,與內源miRNA所觀察到的相似。在轉染后72小時,基因表達被有效抑制。

        利用miScript miRNA Inhibitors來阻遏內源miRNA

        miScript miRNA Inhibitors是合成的、化學修飾的單鏈RNA,它們在轉染進入細胞后特異地抑制了miRNA的功能。miScript miRNA Inhibitors經過設計和修飾,能確保內源miRNA的功能被高效抑制。時間進程實驗表明,miScript miRNA Inhibitors 在轉染后至少96小時內有效。

        利用miScript Target Protectors來選擇性保護miRNA目標

        miScript Target Protectors 是經過修飾的單鏈RNA,它們能特異干擾miRNA與單個目標之間的相互作用,同時讓同一miRNA對其他目標的調控不受影響。在轉染之后,miScript Target Protectors與其特異的miRNA結合位點結合,阻止miRNA接近此位點,并防止特定miRNA的基因下調作用。miScript Target Protectors 轉染之后是表型或基因表達分析。目標基因表達的增加,信號模式的改變,或表型改變,都能夠提供證據,說明研究中的miRNA和目標與感興趣的通路或表型相關。

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